洁净室浮游菌检测是确保洁净室环境微生物污染控制的重要手段，主要用于评估空气中的微生物污染水平。以下是常见的洁净室浮游菌检测方法的详细介绍：
1. 沉降法（Passive Air Sampling）
原理：利用重力沉降原理，空气中的微生物随尘埃自然沉降到培养皿中。
操作步骤：
1. 在洁净室内选定采样点，将无菌培养皿（通常为90mm直径）开口向上放置。
2. 暴露一定时间（通常为30分钟至4小时，根据洁净度等级和标准要求确定）。
3. 暴露后盖上盖子，送至实验室在适宜条件下培养（例如35℃±2℃，48小时）。
4. 培养后计数菌落数，计算沉降菌浓度。
优点：操作简单，成本低，无需特殊设备。
缺点：只能检测沉降下来的微生物，不能反映空气中的实时微生物浓度，且结果易受气流影响。
2. 主动采样法（Active Air Sampling）
原理：使用空气采样器主动抽取空气，使空气中的微生物粒子撞击到培养基上。
操作步骤：
1. 使用便携式空气采样器（如撞击式采样器），按照设定的流量和时间进行采样。
2. 采样器内装有培养皿，空气通过采样头，微生物被撞击到培养基上。
3. 采样后，将培养皿送至实验室培养，计数菌落。
4. 根据采样体积和菌落数，计算空气中的浮游菌浓度（单位：CFU/m³）。
优点：能够定量检测空气中的微生物浓度，结果更准确。
缺点：设备成本较高，操作相对复杂。
3. 表面接触法（Surface Sampling）
原理：通过直接接触表面或使用拭子擦拭表面，采集表面的微生物。
操作步骤：
1. 使用无菌拭子或接触皿，接触或擦拭待测表面。
2. 将拭子或接触皿送至实验室培养，计数菌落。
优点：能够检测表面微生物污染。
缺点：不能反映空气中的微生物浓度，主要用于表面污染检测。
4. 液体冲击法（Impingement）
原理：将空气抽入含有培养液的容器中，微生物被捕获在液体中。
操作步骤：
1. 使用液体冲击器，空气通过液体，微生物被捕获。
2. 采样后，将液体送至实验室培养或进行其他分析。
优点：能够捕获较小的微生物粒子。
缺点：设备复杂，操作繁琐，不如主动采样法常用。
5. 过滤法（Filtration）
原理：通过滤膜过滤空气，微生物被截留在滤膜上。
操作步骤：
1. 使用滤膜采样器，空气通过滤膜，微生物被截留。
2. 采样后，将滤膜置于培养基上培养，计数菌落。
优点：能够捕获较小的微生物粒子。
缺点：滤膜易受污染，操作需谨慎。
6. 荧光染色法（Fluorescence Staining）
原理：使用荧光染料染色微生物，然后通过荧光显微镜观察。
操作步骤：
1. 采集空气样本，染色后在显微镜下观察。
优点：能够快速检测微生物。
缺点：需要专业设备和技术，不适用于常规检测。
7. PCR法（Polymerase Chain Reaction）
原理：通过扩增微生物的DNA或RNA，检测微生物的存在。
操作步骤：
1. 采集空气样本，提取DNA或RNA，进行PCR扩增。
优点：灵敏度高，能够检测低浓度的微生物。
缺点：设备昂贵，操作复杂，不适用于常规监测。
8. ATP生物发光法（ATP Bioluminescence）
原理：通过检测微生物体内的ATP，间接检测微生物的存在。
操作步骤：
1. 采集空气样本，使用ATP检测试剂盒进行检测。
优点：快速，结果直观。
缺点：不能区分活菌和死菌，结果可能受非微生物ATP影响。
· 选择方法的考虑因素 ·
在实际应用中，选择哪种检测方法取决于以下因素：
· 洁净室级别：高级别洁净室（如ISO 5级）可能需要更精确的主动采样法，而低级别可使用沉降法。
· 检测目的：常规监测多用沉降法或主动采样法；特殊验证或故障排查可能需要更高级方法（如PCR）。
· 经济条件：沉降法成本低，主动采样法及PCR法设备投资较大。
· 操作便利性：沉降法简单易行，其他方法可能需要专业设备和培训。
· 总结 ·
洁净室浮游菌检测方法各有优缺点，沉降法和主动采样法是最常用的两种方法。沉降法适合常规监测，操作简便；主动采样法适合需要定量结果的场景，精度更高。在实际操作中，可根据具体需求综合运用多种方法，以获得更全面的检测结果，确保洁净室环境的微生物污染得到有效控制。